東京172亞株卡介苗（標(biāo)準(zhǔn)品）

產(chǎn)品時(shí)間：2022-03-08

簡(jiǎn)要描述：

NIBSC 07/272 東京172亞株卡介苗（標(biāo)準(zhǔn)品）由日本東京 BCG 實(shí)驗(yàn)室于 2006 年制備。2009 年被確定為東京 172 的第一個(gè) WHO 卡介苗參考試劑。本材料的預(yù)期用途是作為有效性和一致性的比較或參考活力檢測(cè)監(jiān)測(cè)（如培養(yǎng)活菌計(jì)數(shù)和改良的 ATP 檢測(cè)）；使用分子生物學(xué)技術(shù)進(jìn)行身份測(cè)定；以及在臨床前研究中用于評(píng)估新型結(jié)核病疫苗的體內(nèi)試驗(yàn)（如無(wú)毒力分枝桿菌、皮膚反應(yīng)性和保護(hù)試驗(yàn)）。

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詳細(xì)介紹

世界衛(wèi)生組織參考試劑

東京 172 第一代世界衛(wèi)生組織卡介苗疫苗參考試劑

子株

NIBSC 07/272

血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

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